TÉCNICA ALRO M.S. PARA LA CONSERVACIÓN Y EXHIBICIÓN DE PIEZAS ANATÓMICAS

Autores: Rodríguez Federico Ramón; Algarilla, Daniel Gustavo

feromil@hotmail.com

RESUMEN

Luego de varios años trabajando en cátedras de anatomía y Morgues, observamos  los inconvenientes que presenta la conservación en medios líquidos, como lo es el formol .Con  el entusiasmo de mejorar  la didáctica en la enseñanza  de  anatomía incursionamos en el aprendizaje de la Plastinación. La técnica ALRO MS( polímeros, epoxi  y polisiloxano) fue  creada  con la inquietud de disponer  de especímenes  anatómicos en seco. Se utilizaron piezas  humanas y animales, conservadas en formol por largo tiempo. Se procedió a la disección para luego someter  las piezas a una serie de cuatro pasos: La formolización se realizó  en el cadáver completo, luego por sumersión y se realizaron los cortes selectivos para  disecar. La deshidratación se realizó por medio de una serie de alcoholes en graduación decrecientes  y luego Acetato a baja temperatura. La impregnación forzada  con Solución ALRO MS a temperatura ambiente por 20 días y luego 15 días en Cámara de vacío, este  vacío se fue manejando a diferentes presiones dependiendo de la pieza anatómica  que se trató. El curado (endurecimiento) se  realizó con lámparas UV y estufas de cultivo. Se realizaron ciertas modificaciones de esta técnica en el tratamiento de piezas en SNC con buenos resultados.
Concluyendo, logramos obtener piezas anatómicas secas, atóxicas, sin olor, que mantienen las características morfológicas como el color, tamaño, relaciones de sus estructuras viscerales.
Palabras Clave: Plastinación, Técnica, Anatomía, curado. 

INTRODUCCIÓN

El método más eficiente para lograr que el estudiante comprenda fácilmente  anatomía humana con  sus estructuras y relaciones, es por medio del usos de preparados cadavéricos. La mayoría de las cátedras de medicina  de las universidades del mundo tienen el inconveniente de disponer de una amplia gama de especímenes anatómicos y las desventajas de la preservación líquida sumergidas en formol, perjudicial para la salud entre otras cosas. Decidimos montar un laboratorio de Anatomía en la Facultad de Ciencias médicas de la Universidad Católica de Cuyo, con el fin de aplicar técnicas que conserven preparados con sus características naturales y morfológicas dejando de lado la conservación en  formol. Estas técnicas permiten preservar el material cadavérico sustituyendo el agua y grasa de los tejidos por polímeros siliconados, luego de varios ensayos pudimos obtener piezas con una técnica modificada de Plastinación (técnica ALRO MS)  donde se conservaron sus propiedades morfológicas como teníamos pensado. Si bien se observaron  inconvenientes para piezas de Sistema Nervioso Central (S.N.C.) a las cuales tuvimos que modificar tiempos y concentraciones de químicos, logramos mantener intacta su morfología como tamaño y color natural. Donde se distinguen las estructuras tales como sustancias  blanca y gris.
Si hablamos de la técnica ALRO MS podemos decir  que es aplicable a cualquier pieza anatómica. Los químicos utilizados son de uso común y además nos permiten la  conservación de una pieza a temperatura ambiente y por un largo periodo de tiempo, sin que ésta sufra alteraciones de ningún tipo. El objetivo que nos proponemos con la técnica ALRO MS de Plastinación modificada es exhibir especímenes anatómicos en seco, destinados a  estudiantes de las ciencias médicas;  para interesados en la anatomía humana y sus secretos; además para  museos de las diferentes cátedras y universidades que se encuentren  interesadas. Esta técnica nos permite un avance muy importante en la conservación de preparados anatómicos. Y una mejora en la pedagogía de la enseñanza.

MATERIAL Y MÉTODOS       

Para  los trabajos utilizamos piezas anatómicas humanas y animales conservadas en formol. Se procedió a la disección para luego someter  las piezas a una serie de cuatro pasos: formolización, deshidratación, impregnación y curado. La formolización (ver Fig.1) se realiza primero en un cadáver que es inyectado  por vía intra-arterial a la altura de la arteria carótida primitiva y en una segunda vía por medio de la arteria femoral. La solución que se hace pasar por la cánula es formol tamponado, diluido en distintas concentraciones, se  tampona con sulfato monobásico de sodio y sulfato dibásico de sodio,  el cual cumple la función de fijador universal. El formol fija el tejido, es decir provoca  la interrupción del proceso de muerte celular. Este proceso se logra produciendo una coagulación o precipitación lo más completa posible de todos los albuminoides celulares, conservando la configuración correspondiente a su naturaleza amorfa.
La Deshidratación (ver fig.2) como segundo paso del protocolo, indica que los tejidos deben ser despojados de toda el agua que se encuentra en ellos, para esto utilizamos sustancias habidas de agua y alcoholes en distintas graduaciones en forma decreciente partiendo del alcohol 70% 80% 96% y 100%. El fin de este proceso es reemplazar el agua intra y extra celular. Observamos  a nivel tejido que esta serie de alcoholes tendía a retraer la piel y algunas estructuras musculares, lo que nos llevó a utilizar otro deshidratante como es el acetato a baja temperatura. La grasa disminuía  en el espécimen  y  se lograba un  aclaramiento de la pieza.  La deshidratación se realiza a cabo de varios días en pases  de acetato y a temperatura de menos 15°C.
Es el proceso por el cual se logra sacar el acetato y agua remanente de los tejidos, para luego ser reemplazada por polímeros (Solución ALRO MS). En una primera instancia se lo somete a una impregnación que tarda unos 4 a 6 semanas. La pieza es sumergida en un recipiente de vidrio y es cubierta por el polímero en un nivel de  2/3  por encima de la muestra, que comienza a embeberse  desde la superficie a la profundidad, esta es la etapa previa a la más importante que es la impregnación forzada. Utilizamos una cámara de vacío,(ver fig.3)  fabricada en base a los requerimientos necesarios para nuestras piezas anatómicas, la cual está dotada por un tacho de acero inoxidable presurizado y una tapa hermética en la que se encuentra un visor en ojo de buey, que nos permite  examinar las muestras situadas en su interior. Para la impregnación forzada, sometemos  las piezas en solución ALRO MS a una presión negativa con el objeto de extraer del tejido acetato, debido a sus propiedades se volatiliza y deja  que la solución más pesada constituida por polímeros  siliconados penetre atravesando las membranas celulares por osmosis en contra del gradiente de concentración. Las muestras ya en la cámara de vacío son sometidas adiferentes presiones y tiempos. También incluimos trozos más pequeños en parafina para hacer cortes histológicos y observar al microscopio la impregnación. En la que obtuvimos muy buenos resultados. Curado o Endurecimiento. Este es el proceso final de la técnica (verfig 4) donde nos proponemos endurecer el material y dejarlo listo para exhibirlo. Una vez que sacamos el preparado de la cámara es llevado a un sistema de rejillas donde por medio de vibraciones es retirado el excesos de solución ALRO MS, a medida que escurre empieza el endurecimiento de la muestra, este se hace en la estufa bacteriológica donde a una temperatura entre  55° y 60°C, se activan los catalizadores de la solución y al cabo de unas horas el preparado estaría listo para sacar, generalmente se le aplica una laca protectora contra polvo y contaminación.
Para los preparados propios en resinas utilizamos lámparas UV. Que activan los catalizadores por medio de rayos UV. Este tipo de curado no es el que nosotros utilizamos de rutina ya que preferimos usar polímeros siliconados y no resinas.     

RESULTADOS

Luego de los cuatros pasos que sigue la técnica ALRO MS logramos obtener como resultado piezas anatómicas con excelentes condiciones estructurales, secas es decir sin formol, atoxicas, manipulables de forma directa que mantienen las características morfológicas como lo es el color, tamaño y  su conformación externa. Los cortes histológicos de S.N.C.(ver fig.5) coloreados con la técnica Impregnación Argéntica muestran histoarquitectura conservada; las células neuronales se encuentran dentro de sus celdas, no distorsionadas. Se visualizan además estructuras correspondientes  a la glía o célula de sostén y estructuras vasculares. Con lo que corroboramos el proceso de fijación, deshidratación e impregnación. Los  resultados que esperamos con respecto al vacío fueron óptimos ya que permitió que el polímero ingresara totalmente dentro de la célula y con respecto al curado o endurecimiento por medio de calor y luz UV. Logramos  una pieza  seca y rígida con una conservación por largo tiempo

DISCUSIÓN

Unos de los inconvenientes que se presentó en la técnica ALRO MS fue en el método de impregnación forzada ya que ésta exigía una pieza deshidratada con poca exposición al medio ambiente para poder lograr con la cámara de vacío mantener el color y la forma. Esto nos llevó a realizar varias pruebas para lograr que el polímero ingresara al tejido a una presión negativa que no superara la tensión superficial de la solución. Evitando así que no destruya el preparado anatómico

CONCLUSIONES

Logramos piezas anatómicas didácticas  útiles para la enseñanza de anatomía normal y patológica, para muestras  de museos. Con las características de ser secas, sin formol, inodoras, atoxicas  y morfológicamente similares a las estructuras normales

BIBLIOGRAFÍA

    
ANEXOS

Fig. 1 Feto

Fig.2 deshidratación

Fig.3 Cámara de vacío

Fig.4 Corte sagital de feto terminado  luego del curado con la técnica ALRO MS

Fig 5.  Riñón plastinado